沙丁胺醇的检测方法研究进展

２０１７年第１期　中国饲料　００　０■囵圆圄墨■　０　ＤＯＩ：１０．１５９０６￣．ｃｎｋｉ．ｃｎｌ１—２９７５／ｓ．２０１７０１０７　０　０ｌｌｌｌ　Ｉｌ　ｌ『摘要１沙丁胺醇是ｐ一兴奋剂的一种，在临床应用中能有效地治疗支气管哮喘、肺气肿等常见哮喘类呼吸道疾　病。在畜牧业中能提高瘦肉率，但由于Ｂ一兴奋剂易产生残留而危害食用者的身体健康，因此大部分国家通过立法以　禁止ｐ一兴奋剂的使用。本文就ｐ一兴奋剂中沙丁胺醇的危害以及常用检测方法作一简述。　ｆ关键词１沙丁胺醇；检测；方法　［中图分类号］￥８１６．１７　［文献标识码】Ａ　［文章编号］１００４－３３ｌ４（２０ｌ７）Ｏ１一Ｏ０３３一Ｏ３　（Ａｂｓｔｒａｃｔ］Ｓａｌｂｕｔａｍｏｌ　ｓｕｌｆａｔｅ　ｉｓ　ａ　ｋｉｎｄ　ｏｆ　ｂｅｔａ　ａｄｒｅｎｅｒｇｉｃ　ａｇｏｎｉｓｔｓ，ｗｈｉｃｈ　ｈａｖｅ　ｅｆｆｅｃｔｉｖｅ　ｔｒｅａｔｍｅｎｔ　ｏｆ　ｂｒｏｎｃｈｉａｌ　ａｓｔｈ—　ｍａ，ｅｍｐｈｙｓｅｍａ　ａｎｄ　ｏｔｈｅｒ　ｃｏｍｎｌｏｎ　ａｓｔｈｍａ　ｒｅｓｐｉｒａｔｏｒｙ　ｄｉｓｅａｓｅｓ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｃｌｉｎｉｃａ１．Ｉｎ　ａｎｉｍａｌ　ｈｕｓｂａｎｄｒｙ，ｓａｌｂｕｔａｍｏｌ　ｃａｎ　ｅｆｆｅｃ—　ｔｉｖｅｌｙ　ｉｍｐｒｏｖｅ　ｔｈｅ　ｒａｔｅ　ｏｆ　ｌｅａｎ　ｍｅａｔ，ｗｈｉｌｅ　ｄｕｅ　ｔｏ　ｂｅｔａ　ｄｏｐｉｎｇ　ｐａｒｔｉｃｕｌａｒｌｙ　ｐｒｏｎｅ　ｔｏ　ｐｒｏｄｕｃｅ　ｒｅｓｉｄｕａｌ　ａｎｄ　ｈａｒｍ　ｔｈｅ　ｈｅａｌｔｈ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｈｕｍａｎ　ｂｏｄｙ，ｍｏｓｔ　ｃｏｕｎｔｒｉｅｓ　ｌｅｇｉｓｌａｔｉｏｎ　ｐｒｏｈｉｂｉｔ　ｔｈｅ　ｕｓｅ　ｏｆ　ｓｔｉｍｕｌａｎｔｓ　ｂｅｔａ．Ｉｎ　ｔｈｉｓ　ｐａｐｅｒ，ｔｈｅ　ｄａｎｇｅｒｓ　ｏｆ　ｓａｌｂｕｔａｍｏｌ　ａｎｄ　ｉｔｓ　ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ　ｍｅｔｈｏｄｓ　ｗｅｒｅ　ｒｅｖｉｅｗｅｄ．　［Ｋｅｙ　ｗｏｒｄｓ】ｓａｌｂｕｔａｍｏｌ；ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ；ｍｅｔｈｏｄｓ　１　沙丁胺醇的作用与危害性　沙丁胺醇化学名为１一（４－羟基一３一羟甲基苯　良好弹性，不易渗血。长期使用沙丁胺醇饲喂的生　猪皮肤光亮、色泽光鲜，毛较少，臀部圆润且上翘，　基），属于Ｂ一兴奋剂的一种。添加５～１０倍剂量的　伤口不易愈合，易跛足，及蹄部易感染，易渗血等　（毕玉香，２００９）。另外，其瘦肉率高、脂肪少、肌肉　饱满、瘦肉纤维疏松。感官检测法对人员的技术要　沙丁胺醇可增强蛋白质的合成和脂肪组织代谢能　力（王振玲等。２０１４），从而达到提高饲料利用率、　改善肉质（赵德明，２００８：Ｚｈａｎｇ等，２００７）、促进禽　类生长的目的（黄素文等，２００７）。沙丁胺醇易在人　求比较低，适用于各种人员，但会因每个人的判定　标准不同而产生误判。　２．２　酶联免疫吸附法　酶联免疫吸附法　和动物的内脏、器官中残留（Ｓｈｅｌｖｅｒ等，２００３），产　生的毒性对心脏、肝脏、肾脏的危害较大（孙书刚　（ＥＬＩＳＡ）是当前最常用的检测方法之一，也是当　前分析化学的重点研究方向。酶联免疫吸附法的　等，２０１５），易使糖尿病、心脑血管疾病病人病情恶　化，严重危害人们的身体健康。近年来发生多起沙　丁胺醇中毒事件（胡萍。２００８）。因此，高效、实用的　检测方法对畜产品安全有着重要的作用（Ｗａｎｇ　等．２００６）．本文就猪肉以及猪尿中的沙丁胺醇检　测方法作一概述。　２沙丁胺醇的检测方法　原理是用酶复合物和抗体结合，从而产生显色反　应以检测沙丁胺醇是否存在．酶联免疫法的检测　限为０．１　ｐｐｂ（Ｓａｗａｙａｗｎ，２０００），灵敏度较高。沙　丁胺醇的分子结构与莱克多巴胺相似，检测时容　易产生交叉反应。为了建立沙丁胺醇直接竞争酶　联免疫法，王俊平等（２０１１）使用沙丁胺醇多克隆　抗体进行了试验．结果所获得ＩＣ１５的值为０．０５　正常生猪色泽淡红，肉质具有　２．１　感官检测法通讯作者　ｎｇ／ｍＬ，具有较高的灵敏度。酶联免疫法具有检测　时间短、操作简单、见效快等优点，目前可作为一　中国饲料　２０１７年第１期　个快速检测方法，并不能作为确证方法。　２．３胶体金免疫法胶体金免疫法（ＧＩＦＡ）是以　胶体金为示踪物．对沙丁胺醇进行快速检测的方　法。其原理为在硝酸纤维素膜上加入待测样品，　以液体的胶体金为标记抗体，对渗滤膜中形成的　抗体抗原复合物进行检测，如果试验结果为阳　性，硝酸纤维素膜上会有红色斑点显现（吴巧丽　和叶春生，２０１２）。彭涛等（２０１５）利用胶体金免疫　层析法对猪尿中的沙丁胺醇进行了快速检测，其　检测限为０．８３　ｇ／Ｌ，回收率为８６．６％一１０９．７％。　韩京朋等（２０１４）对猪尿中的沙丁胺醇建立了胶　体金检测法，用时５　ｒａｉｎ，可检测出猪尿中的　ＳＡＬ，检测限为３．０　ｇ／Ｌ。由此可见，胶体金免疫　法具有操作简便、见效迅速、成本低廉的优点。但　此法只能作为初步的筛选方法来确定样品是否　含有８兴奋剂，并不能准确的检测出样品中是否　含有沙丁胺醇。　２．４　色谱法　２．４．１　气象色谱一质谱法　气象色谱一质谱法　（ＧＣ—ＭＳ）是一种可定性和定量的检测方法，其在　检测样品中沙丁胺醇含量的应用中已十分成熟。　在使用气相色谱法检测样品中的沙丁胺醇时，通　常要经过处理、净化、衍生三个步骤（管健等，　２００７）。王建平等（２００７）对猪肝中的沙丁胺醇建　立了免疫亲和色谱一气相色谱／质谱法，又称Ｉ—　ＡＣ—ＧＣ／ＭＳ法，检测限为０．５　ｎｇ／ｇ，定量限为２　ｎｇ／ｇ，　回收率为７８．４％～１０６．９％。气相色谱法检测精　准度高、灵敏度高、稳定性强（Ｓｈｅｎ等，２００５），但　是实验仪器昂贵，不能普及使用，检测时间慢，　不适合快速检测，而且气相色谱法操作难度大，　对实验人员的技术操作与专业知识要求较高。　２．４．２反相高效液相色谱一紫外法反相高效液　相色谱一紫外法是利用含有沙丁胺醇的溶液在紫　外下特定的吸收波长．用紫外分光光度计对其进　行波长扫描，会有一条特异的峰型曲线。秦永平　（２００３）等对血浆中的沙丁胺醇建立了反相高效液　相色谱一紫外法，以吗啡为内标，采用Ｕｈｒａｓｐｈｅｒ　Ｃｙａｎｏ分析柱（２５０　ｍｍｘ４．６　ｍｍ，５　ｍ），乙腈：甲　醇：Ｏ．０２５　ｍｏｌ／Ｌ磷酸铵缓冲液（２：０．５：９７＿５）为流动　相，在２２４　ｔｉｍ波长下检测离子萃取纯化后的样品，　按内标法进行定量，标准曲线在０．５～３２　ｇ／Ｌ　内有良好线性关系，最低检测浓度为０．３　Ｉ．ｚｇ／Ｌ，　萃取回收率为９３％～９９％，方法回收率为９８％～　１０９％，批内ＲＳＤ小于５％，｝比问ＲＳＤ小于８％，回　收率高。　２．４＿３　高效液相色谱一二极管阵列检测法　高效　液相色谱一二极管阵列检测法是当前沙丁胺醇检　测法中一种较为重要的检测方法，二极管阵列检　测器工作原理是组分选择性吸收通过样品池的复　色光进入单色器，然后照射在二极管阵列装置上，　二极管阵列装置把光信号转化为电信号，从而获　得特定组分的成分。戴华等（２００３）在检测饲料中　的盐酸克伦特罗与沙丁胺醇时利用了高效液相色　谱一二极管阵列检测法，测得盐酸克伦特罗、沙丁　胺醇的定量下限分别为０．１０、０．３６　ｍｇ／ｋｇ，回收率　分别大于８８％、７４％，ＲＳＤ（ｎ＝５）分别小于６．４％、　３．０％。尚红霞等（２００３）在检测饲料中沙丁胺醇含　量时使用了Ａｍｂｅｒｌｉｔｅ　ＸＡＤ一２大孑Ｌ吸附树脂进行　固相萃取，解决了萃取时产生的乳化问题，取得了　良好的试验结果。这种检测方法的优点在于检测　精确度高、噪音低、成本低、易于操作和推广、可提　供组分的定性信息（Ｋｏｒｆｍａｃｈｅｎ，２００５），而且还可　以得到任意时间的光谱图。　２．４－４高效液相色谱一串联质谱法　高效液相色　谱一串联质谱法（ＨＰＬＣ—ＭＳ）也是沙丁胺醇的常用　检测法之一．该方法采用乙酸铵缓冲液酶以及经　混合阳离子交换柱净化的提取液解提血浆中的目　标化合物，再采用超高效液相色谱对化合物进行　检测。此法对猪肝中的沙丁胺醇含量检测可精确　到０．１　ｔｘｇ／ｋｇ　为了检测动物血液中的沙丁胺醇含　量，王凤美等（２０１５）对其建立了高效液相色谱一　串联质谱法．线性相关系数均大于０．９９，测定低限　为０．５￣ｇ／ｋｇ．说明沙丁胺醇回收良好。谷丽丽等　（２０１０）利用高效液相色谱一串联质谱法对病理小　鼠的肝脏进行检测，并对其建立病理模型，可以详　细的观察出沙丁胺醇的含量以及变化趋势，并且　其精确度、灵敏度都较高（Ｊｏｓｅｆｓｓｏｎ等，２００６；　Ｓｐｙｆｉｄａｋｉ等，２００６）。但是质谱仪操作复杂，仪器　昂贵，不易普及使用。　３　小结　沙丁胺醇的检测方法在日益发展，检测灵敏　度和精确度也在不断的提高。相信随着科技的不　断进步，沙丁胺醇的检测技术会变的越来越成熟，　检测方法会更加精确、简单。　２０１７年第１期　中国饲料　一３５一　参考文献　【１１毕玉香瘦肉精的残留危害及监控对策Ｕ】．畜牧兽医科技信息，２０（｝９，４　（６）：１３６　［２Ｊ戴华．袁智能，黄志强，等饲料中盐酸克伦特罗、沙丁胺醇高效液相色　谱测定Ｕ】分析测试学报，２（）（）３，２２（３）：５７～６０　［３】管健，王立媛，吴平谷，等．同住素作内标气质联机测定动物源食品中４　种１３２一兴奋剂的含量ｏ】中国卫生检验杂志，２００７，１７（１２）：２１９４～２１９６　［４］谷丽丽，李飞，牛英豪，等沙丁胺醇的病理作用研究及其液相色谱一串　联质谱方法的检测［Ｉ】食品科学，２０１０，３１（３）：２２４～２２９　ｆ５】韩京朋．吴小平，邱检萍，等动物尿液中沙丁胺醇残留检测试纸条的研　制ｌＩ＿黑龙江畜牧兽医，２１）１４，７：１７４～１７６　【６］胡萍，余少文，李红中国１３省Ｉ９９９年～２（）ｎ５年瘦肉精食物中毒个案　分析Ｕ】深圳大学学报（理Ｉ版），２００８，２５（１）：１～６　［７】黄素文，周宏斌，赵秀玲，等饲料中沙丁胺醇快速检测技术研究Ⅲ．中国　饲料．２００７．１７：３（）～３１　【８］彭涛胶体金免疫层析法快速定量检测猪尿中１３２一受体激动剂残留的　研究：［硕士学位论文Ｊ【Ｄ】江西南昌：南昌大学，２０１５　［９】秦永平，邹远高，梁茂植，等柱切换一反相高效液相色谱法测定血浆中　沙丁胺醇浓度叫四川大学学报（医学版），２（｝０３，３：５７６～５７９　［１０］尚红霞，张智，用晓辉用高效液相色谱法分析克仑特罗和沙丁胺醇Ⅱ１　化学世界，２００３，４４（８）：４１２～４１５　［１１１孙书刚，李建伟，张富刚，等沙丁胺醇及其常用检测方法刚中国畜牧　业．２０１５．３：５７～５８　【１２］Ｙ－Ｎ．美，何京橙，张鸿伟，等超高效液相色谱一串联质谱法检测动物血　浆中克伦特罗、莱克多Ｇ，ＲＰ－、沙丁胺醇Ｕ】食品安全质量检测学报，２０１５，１２：　５｛｝２４～５０２８　［１３】Ｙ－建平，史为民，沈建忠免疫亲和色谱一气相色谱／质谱法（Ｉ—ＡＣ—　ＧＣ／ＭＳ）检测猪肝中的沙丁胺醇与克伦特罗［Ｉ］畜牧兽医学报，２００７，３８　（３）：２７１～２７５　［１４】王俊平，赵云襄，王硕，等沙丁胺醇直接酶联免疫快速检测的方法叭　食品研究与开发，２１１１１．３２（２）：９７～１ｆ１（）　【１５］吴巧丽，叶春生胶体金免疫层析技术快速检测沙丁胺醇残留田现代　食品科技．２（）１２．１Ｉ：Ｉ５９５～１５９９　［１６ｌ王振玲，章丽娇，段跃强，等猪轮状病毒的分离与电镜观察Ⅱ］．畜牧与　兽医，２０１４（１）：７４　ｆ１７］赵德明猪病学【Ｍ】北京：中国农业大学出版社，２００８：４９３　【１　８］Ｊｏｓｅｆｓｓｏｎ　Ｍ，Ｓａｂａｎｏｖｉｃ　Ａ　Ｓａｍｐｌｅ　ｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎ　ｏｎ　ｐｏｌｙｍｅｒｉｃ　ｓｏｌｉｄ　ｐｈａｓｅ　ｅｘ——ｔｒａｃｔｉｏｎ　ｓｏｒｂｅｎｔｓ　ｆｏｒ　ｌｉｑｕｉｄ　ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈ——ｉｃ——ｔａｎｄｅｍ　ｍａｓｓ　ｓｐｅｃｔｒｏｍｅｔｒｉｃ　ａｎａｌｙｓｉｓ　ｏｆ　ｈｕｍａｎ　ｗｈｏｌｅ　ｂｌｏｏｄ—Ａ　ｓｔｕｄｙ　ｏｎ　ａ　ｎｕｍｂｅｒ　ｏｆ　ｂｅｔａ—ａｇｏｎｉｓｔｓ　ａｎｄ　ｂｅｔａ—ａｎｔａｇｏｎｉｓｔｓ［Ｊ］Ｊ　ＣｈｒｏｍａｔｏｇｒＡ，２００６，１１２１１）（１２）：１～１２　【１９］Ｋｏｒｆｃｈｅｎ　Ｗ　Ａ　Ｆｏｕｎｄａｔｉｏｎ　ｒｅｖｉｅｗ：Ｐｒｉｎｃｉｐｌｅｓ　ａｎｄ　ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ　ｏｆ　ＬＣ—ＭＳ　ｉｎ　ｎｅｗｄｒｕｇ　ｄｉｃｏｖｅｒｙ［Ｊ］Ｄｒｕｇ　Ｄｉｓｃｏｖ　Ｔｏｄａｙ，２００５，１０：１３５７．　［２０】Ｓａｗａｙａｗｎ，Ｌｏｎｅ，Ｈｕｓａｉｎ　Ａ，ｅｔ　Ｓｃｒｅｅｎｉｎｇ　ｏｆｒ　ｐ—ａｇｏｎｉｓｔｓ　ｉｎ　ｓｈｅｅｐ　ｕｒｉｎｅ　ａｎｄ　ｅｙｅｓ　ｂｙ　ａｎ　ｅｎｚｙｍｅ—ｌｉｎｋｅｄ　ｉｍｍｕｎｏｓｏｒｂｅｎｔ　ａｓｓａｙ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｓｔａｔｅ　ｏｆ　Ｋｕｗａｉｔ［Ｊｌ　Ｆｏｏｄ　Ｃｏｎｔｒｏ１．２０００，１１：１～５　［２１　Ｊ　Ｓｈｅｎ　Ｓ　Ｈ，Ｏｕｙａｎｇ　Ｊ，Ｂａｅｙｅｎｓ　Ｗ　Ｒ　Ｇ，ｅｔ　ａｌＤｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ　ｏｆ８一ａｇｏ—　ｎｉｓｔｓ　ｂｙ　ｉｏｎ　ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ　ｗｉｔｈ　ｄｉｒｅｃｔ　ｃｏｎｄｕｃｔｉｖｉｔｙ　ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ［Ｊ］ＯＰｈａｒｍａｃｅｕ—　ｔｉ－ｃａｌａｎｄＢｉｏｍｅｄｉｃａｌ　Ａｎａｌｙｓｉｓ，２００５，３８：１６６～１７２　［２２］Ｓｈｅｌｖｅｒ　Ｗ　Ｌ，Ｓｍｉｔｈ　Ｄ　Ｊ　Ｄｅｔｅｒｍｉ—ｎａｔｉｏｎ　ｏｆ　Ｒａｃｔｏｐａｍｉｎｅ　ｉｎＣａｔｔｌｅ　ａｎｄ　Ｓｈｅｅｐ　Ｕｒｉｎｅ　Ｓａｍｐｌｅｓ　Ｕｓｉｎｇ　ａｎ　Ｏｐｔｉｃａｌ　ＢｉｏｓｅｎｓｏｒＡｎａｌｙｓｉｓ：Ｃｏｍｐａｒａｔｉｖｅ　Ｓｔｕｄｙ　ｗｉｔｈ　ＨＰＬＣ　ａｎｄ　ＥＬＩＳＡ　Ｕ］Ｏｏｕｒ　ｎａｌ　ｏｆ　Ａｇｎｃｕｌｔｕｒ￣ａｎｄ　Ｆｏｏｄ　Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，　２｛）０３．５Ｉ：３７２１～３　７５１　［２３］Ｓｐｙｒｉｄａｋｉ　Ｍ　Ｈ，Ｖｏｎａｐａ￣ｉ　Ｐ　Ｋ　Ａ，Ｖａｌａ—ｖａｎｉ　Ｐ，ｅｔ　ａｌＤｏｐｉｎｇ　ｃｏｎｔｒｏｌ　ａｎａｌ—　ｙｓｉｓ　ｉｎ　ｈｕ——ｍａｎ　ｕｒｉｎｅ　ｂｙ　ｌｉｑｕｉｄ　ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ——ｄｅｃ—　ｔｒｏｓｐｒａｙ　ｉｏｎｉｚａｔｉｏｎ　ｉｏｎ　ｔｒａｐ　ｎｌａｓｓ　ｓｐｅｃｔｒｏｍｅ—ｔｙｒ　ｆｏｒ　ｔｈｅ　ＯｌｙｍｐｉｃＧａｌｎｅｓＡｔｈｅｎｓ　２ＯＯ４：Ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｏｆ　ｃｏｒｔｉｃｏｓｔｅｒｏｉｄｓ　ａｎｄ　ｑｕａｎ—ｔｉｉｆｃａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｅｐｈｅｄｒｉｎｅｓ，ｓａｌｂｕｔａｍｏｌ　ａｎｄｍｏｒｐｈｉｎｅ［Ｊ１．　Ａｎａｌ　Ｃｈｉｍ　Ａｃｔａ，２００６，５７３（１）：２４２～２４９　【２４】ＷａｎｇＪ　ｐ，Ｌｉ　ｘ　Ｗ，Ｚｈａｎｇ　Ｗ，ｅｔ　ｏｌ　Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ　ｏｆｉｍｍｕｎｏａｆｉｆｎｉｔｙ　ｓａｍ—　ｐｌｅ—ｐｕｒｉｉｆｃ—ａｔｉｏｎ　ｆｏｒ　ＧＣ—ＭＳ　ａｎａｌｙｓｉｓ　ｏｆ　ｒａｃｔｏｐａｍｉｎｅ　ｉｎ　ｓｗｉｎｅ　ｔｉｓｓｕｅ［Ｊｌ　Ｃｈｒｏ—　ｍａｔｏｇｒａｐｈｉａ，２００６，６４（９）：６１３　【２５】ＺｈａｎｇＹ　Ｔ，Ｚｈａｎｇ　Ｚ　Ｊ，Ｓｕｎ　Ｙ　Ｈ，ｅｔ　ｃｄＤｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ　ｏｆ　ａｎａｌｙｔｉｃａｌ　ｍｅｔｈｏｄ　ｏｆｒ　ｔｈｅｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ　ｏｆＢ—ａｇｏｎｉｓｔ　ｒｅｓｉｄｕｅｓｉｎ　ａｎｉｍａｌ　ｔｉｓｓｕｅｓ　ｂｙ　ｈｉｇｈ—ｐｅｒｆｏｒ—　ｍａｎｃｅｌｉｑｕｉｄｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ　ｗｉｔｈ　ｏｎ—ｌｉｎｅ　ｅ１ｅｃｔｒｏｇｅｎｅｒａｔｅｄ［ｃｕ（ＨＩｏ６）２］５一一　ｌｕｍｉｎｏｌ　ｃｈｅｍｉｌｕｍｉｎｅｓｃｅｎｃｅｄｅｔｅｃｔｉｏｎ　Ｏ］Ｏｏｕｒｎ￣ｏｆ　ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒｅ　ａｎｄｆｏｏｄ　ｃｈｅｍ—　ｉｓｔｙｒ，２００７．５５（１３）：４９４９～４９５６■　（上接第２２页）　【２０］Ｌｉｕ　Ｂ，ＳｏｎｇＪ，Ｌｉ　Ｙ，ｅｔ　Ｔｏｗａｒｄｓ　ｉｎｄｕｓｔｉｒａｌｌｙ　ｆｅａｓｉｂｌｅ　ｔｒｅａｔｍｅｎｔ　ｏｆｐｏｔａｔｏ　ｓｔａｒｃｈ　ｐｒｏｃｅｓｓｉｎｇ　ｗａｓｔｅ　ｂｙ　ｍｉｘｅｄ　ｃｕｌｔｕｒｅｓ　Ｕ　ＪｌＡｐｐｌ　Ｂｉｏｃｈｅｍ　Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ，　２０１３，１７１（４）：１０１）１～１１）１０　［２１］Ｋｒａｌ　Ｋ，Ｐｅｄｅ￣ｅｎ　Ｌ＿Ｌｏｗ—ｅｎｅｒｇｙ　ａｎｄ　ｈｉｇｈ—ｆｉｂｒｅ　ｌｉｖｅｒ　ｐａｔｅ　ｐｒｏｃｅｓｓｅｄ　ｕｓｉｎｇ　ｐｏｔａｔｏ　ｐｕｌｐＵ１．Ｅｕｒ　Ｆｏｏｄ　Ｒｅｓ　Ｔｅｃｈｎｏｌ，２００５，２２１１（３／４）：２７８～２８２　［２２】Ｌｉｎｅｈｎａ　Ｂ，Ｓｃｈｅｉｉｆｎｇｅｒ　Ｃ　Ｃ，Ｗｏｌｉｎ　Ｍ　Ｊ．Ｎｕｔｒｉｔｉｏｎａｌ　ｏｆ　ｒｅｑｕｉｒｅｍｅｎｔｓ　ｏｆＳｅ—　ｌｅｎｏｍｏｎａｓ　ｒｕｍｉｎａｔｉｏｎ　ｆｏｒ　ｇｒｏｗｔｈ　ｏｎ　ｌａｃｔａｔｅ，Ｇｌｙｃｅｒｏｌ，ｏｒ　Ｇｌｕｃｏｓｅ　Ｕ］Ｊ　Ｄａｉｒｙ　Ｓｃｉ，１９７８，３５（２）：３１７～３２２　【２３】Ｍａｙｅｒ　Ｆ　Ｐｏｔａｔｏ　ｐｕｌｐ：ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ，ｐｈｙｓｉｃａｌ　ｎｍｄｉｉｆｃａｔｉｏｎ　ａｎｄ　ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ卟　Ｐｌｏｙｍ　Ｄｅｇｒａｄ　Ｓｔａｂ，１９９８，５９（１／３）：２３１～２３５　［２４】Ｍｅｎｋｅ　Ｋ　Ｈ，Ｒａａｂ　Ｌ，Ｓａｌｅｗｓｋｉ　Ａ，ｅｔ　ｏｌ　Ｔｈｅ　ｅｓｔｉｍａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｄｉｇｅｓｔｉｂｉｌｉｔｙ　ａｎｄ　ｍｅｔａｂｏｌｉｚａｂｌｅ　ｅｎｅｒｇｙ　ｃｏｎｔｅｎｔ　ｏｆ　ｒｕｍｉｎａｎｔ　ｆｅｅｄｉｎｇ　ｓｔｕｆｆｓ　ｆｒｏｍ　ｔｈｅ　ｇａｓ　ｐｒｏ—　ｄｕｃｔｉｏｎ　ｗｈｅｎ　ｔｈｅｙ　ａｒｅ　ｉｎｃｕｂａｔｅｄ　ｗｉｔｈ　ｔｕｒｅｅｎ　ｌｉｑｕｏｒ　ｉｎ　ｖｉｔｒｏ　Ｄ］Ｊ　Ａｇｎｃ　Ｓｃｉ，　１９７９，９３（１）：２１７～２２２　［２５】Ｍｕｃｋ　Ｒ　Ｅ，Ｆｉｌｙａ　Ｉ，Ｃｏｎｔｒｅｒａｓ—Ｇｏｖｅａ　Ｆ　Ｅ　Ｉｎｏｃｕｌａｎｔ　ｅｆｆｅｃｔｓ　ｏｎ　ａｌｉｆｌ￣　ｓｉｌａｇｅ：ｉｎ　ｖｉｔｒｏ　ｇａｓ　ａｎｄ　ｖｏｌａｔｉｌｅ　ｆａｔｔｙ　ａｃｉｄ　ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ　Ｕ］Ｊ　Ｄａｉｙｒ　Ｓｃｉ，２１１１）７，９０　（１１）：５１ｉ５～５１２５．　【２６】Ｏｋｉｎｅ　Ａ，Ｈａｎａｄａ　Ｍ，Ａｉｂｕｂｕｌａ　Ｙ，ｅｔ　ｏｌ　Ｅｎｓｉｌｉｎｇ　ｏｆ　ｐｏｔａｔｏ　ｐｕｌｐ　ｗｉｔｈ　ｏｒ　ｗｉｔｈｏｕｔ　ｂａｃｔｅｒｉａｌ　ｉｎｏｃｕｌａｎｔｓ　ａｎｄ　ｉｔｓ　ｅｆｆｅｃｔ　ｏｎ　ｆｅｒｍｅｎｔａｔｉｏｎ　ｑｕａｌｉｙｔ，ｎｕｔｉｒｅｎｔ　ｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎ　ａｎｄ　ｎｕｔｒｉｔｉｖｅ　ｖａｌｕｅ［Ｊ］Ａｎｉｍ　Ｆｅｅｄ　ＳｃｉＴｅｃｈ，２０（）５，１２１（３／４）：３２９～　３４３　【２７】Ｓｃｈａｅ￣ｒ　Ｄ　Ｍ．Ｄａｖｉｓ　Ｃ　Ｌ，Ｂｒｙａｎｔ　Ｍ　Ｐ　Ａｍｍｏｎｉａ　ｓａｔｕｒａｔｉｏｎ　ｃｏｎｓｔａｎｔｓ　ｆｏｒ　ｐｒｅｄｏｍｉｎａｎｔ　ｓｐｅｃｉｅｓ　ｏｆ　ｒｕｍｅｎ　ｂａｃｔｅｒｉａ田Ｊ　Ｄａｉｙｒ　Ｓｃｉ，１９８０，６３（８）：１２４８～　１２６３　【２８］Ｓｕｇｉｍｏｔｏ　Ｍ，Ｓａｉｔｏ　Ｗ，Ｏｏｉ　Ｍ．Ｔｈｅ　ｅｆｆｅｃｔｓ　ｏｆ　ｕｒｅａ—ｔｒｅａｔｅｄ　ｐｏｔａｔｏ　ｐｕｌｐ　ｅｎｓｉｌｅｄ　ｗｉｔｈ　ｂｅｅｔ　ｐｕｌｐ　ｏｒ　ｗｈｅａｔ　ｂｒａｎ　ｐｅｌｌｅｔｓ　ｔｏ　ｒｅｄｕｃｅ　ｍｏｉｓｔｕｒｅ　ｏｆ　ＰＰ　ａｎｄ　ｌｆａｋｅ　ｄｅｎｓｉｙｔ　ｏｆ　ｃｏｒｎ　ｒｇａｉｎ　ｓｕｐｐｌｅｍｅｎｔｅｄ　ｗｉｔｈ　ｔｈｅ　ＰＰ　ｓｉｌａｇｅ　ｏｎ　ｄｉｇｅｓｔｉｂｉｌｉｙｔ　ａｎｄ　ｒｕｍｉｎａｌ　ｆｅｒｍｅｎｔａｔｉｏｎ　ｉｎ　ｂｅｅｆ　ｓｔｅｅｒｓ［Ｊ］Ａｎｉｍ　Ｓｃｉ，２０１０，８１（３）：３１６～３２４．　【２９］Ｖａｎ　Ｓｏｅｓｔ　Ｐ　Ｊ，Ｓｎｉｆｅｎ　Ｃ　Ｊ．Ｍｅｒｔｅｎｓ　Ｄ　Ｒ．ｅｔ　Ａ　ｎｅｔ　ｐｒｏｔｅｉｎ　ｓｙｓｔｅｌｎ　ｆｏｒ　ｃａｔｔｌｅ：ｔｈｅ　ｌｕｍｅｎ　ｓｕｂｍｏｄｅｌ　ｆｏｒ　ｎｉｔｒｏｇｅｎ［Ｃ］／／ＯＷＥＮＳ　Ｆ　Ｎ　Ｐｒｏｔｅｉｎ　ｒｅｑｕｉｒｅ—　ｍｅｎｔｓ　ｆｏｒ　ｃａｔｔｌｅ：ｐｒｏｃｅｅｄｉｎｇｓ　ｏｆ　ａｎ　ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ　ｓｙｍｐｏｓｉｕｍ　Ｓｔｉｌｗａｔｅｒ：Ｏｋｌａ—　ｈｏｍａ　Ｓｔａｔｅ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｙｔ，１９８１：２６５～２７９　［３０】Ｗａｎｇ　Ｙ　Ｓ，Ｓｈｉ　Ｗ，Ｈｕａｎｇ　Ｌ　Ｔ，ｅｔ　ｏｌ　Ｔｈｅ　ｅｆｆｅｃｔ　ｏｆ　ｌａｃｔｉｃ　ａｃｉｄ　ｂａｃｔｅｒｉａｌ　ｓｔａｒｔｅｒ　ｃｕｌｔｕｒｅ　ａｎｄ　ｃｈｅｍｉｃａｌ　ａｄｄｉｔｉｖｅｓ　ｏｎ　ｗｉｌｔｅｄ　ｒｉｃｅ　ｓｔｒａｗ　ｓｉｌａｇｅ　Ｕ】Ａｎｉｍ　Ｓｃｉ，　２０１６，８７（４）：５２５～５３５■