高效液相色谱法测定菊粉酶解产物

2003年北京化工大学学报

JOURNALOFBEIJINGUNIVERSITYOFCHEMICALTECHNOLOGY

Vol.30,No.1

2003

高效液相色谱法测定菊粉酶解产物

孙彦璞1,2　杨文远2　姜　玲3

(11北京化工大学理学院,北京　100029;21宁夏大学化学化工学院;31城市环境保护学院,银川　750021)

摘　要:采用高效液相色谱法以Shim2packCLC2NH2柱为分析柱,乙腈与水(体积比为7∶3)为流动相,以RID26A示差折光仪为检测器,测定了菊粉酶解产物中的葡萄糖、果糖和蔗糖,为菊粉酶解产物的测定提供了科学依据。关键词:菊粉酶解产物;高效液相色谱;葡萄糖;果糖;蔗糖中图分类号:O657172

引　言

菊芋俗称洋姜,鬼子姜,为多年生菊科草本植

物,全国各地均有栽培。菊芋茎中的主要成分为菊粉,是一种碳水化合物,为多聚果糖[1],由α2呋喃果糖以β21,2糖甙键连接,在其还原端接一个葡萄糖残基,聚合度为30左右[2]。宁夏产菊芋块中菊粉含量在17%～25%(质量分数)之间,比我国南方、华北和东北地区高40%～60%。菊粉酶解的中间产物为蔗糖、果糖、葡萄糖、低聚糖[3],最终产物为果糖和少量的葡萄糖。低聚果糖是目前倍受青睐的“双岐杆菌活化的增殖因子”,有防治便秘、抑制肠内腐败物质形成、提高机体免疫力、改善脂质代谢和降低胆固醇等作用。目前宁夏有关部门已立题开发菊芋产品,项目已列入2000年科技开发产业化项目,得到了区科委、国家农业部等有关部门经费资助。为了配合这项工作,建立了高效液相色谱法分析检测菊粉酶解的产物,为生产过程中的质量控制提供了依据。

乙腈,色谱纯,江苏淮阴精细化工研究所;果糖、葡萄糖、庶糖对照品,北京西中化工厂;水为二次蒸馏水。112　色谱条件

色谱柱,Shim2packCLC2NH2150mm×416mm,填料粒度5μm,带有前置保护柱,流动相,乙腈与水的体积比为7∶3,临用前用微孔膜过滤并用超声波脱气处理。RID26A检测器,灵敏度8×10-6RIU/FS(满刻度),流速110mL/min,柱温为室温。

2　结果与讨论

211　标准溶液的配制与线性实验

分别精确称取果糖、葡萄糖、蔗糖三种对照品各015000g,用水溶解并定容至50mL,然后用流动相稀释成每毫升含012、2、4、6、8、10mg的果糖、葡萄糖、蔗糖的标准系列,按上述色谱条件各进样5μL,其标准色谱图见图1。以峰面积A为纵坐标,浓度

1　实　验

111　仪器与试剂

高效液相色谱SHIM2PACKLC26A系统,RID26A检测器,SLC26A系统控制器,C2R3A数据处理系统,以上均为日本岛津公司制作。CSF21A超声波发生器,上海超声波仪器厂。Millipore溶剂过滤系统,美国Millipore公司生产。

收稿日期:2002203211

第一作者:女,1964年生,讲师E2mail:yanpusun@163.com

(71008)果糖　(71758)葡萄糖　(91657)蔗糖

图1　标准样品色谱图

Fig.1　Chromatographicspectrumofastandardsample

・110・北京化工大学学报　　　　　　　　　　　　　　　　　2003年

X为横坐标进行回归,其回归方程及相关系数r分

别为:

果糖　Y=1326144X+35122,r=019995;葡萄糖　Y=1332156X-43113,r=019994;蔗糖　Y=1495164X-261148,r=019974。其中Y代表A。

实验结果表明:果糖、葡萄糖、蔗糖的浓度在012～10mg/mL范围内时,呈良好线性关系。212　精密度试验

在相同色谱条件下,取同一样品平行进样6次,分别测定果糖、葡萄糖、蔗糖各次的峰面积A,并求其平均值A和精密度RSD。测定结果见表1。样品色谱图如图1所示。

表1　精密度实验

Table1　Testofaccuracy

样品A

RSD/%果糖5566131163葡萄糖5350182169蔗糖

551512

0199

213　回收率的测定

精密量取定量的已测知含量的样品溶液,再加定量的果糖、葡萄糖、蔗糖对照品,然后用流动相稀

释后,按上述方法进行测定,测定结果见表2。

表2　回收率实验(n=3)

Table2　Testofrecoveryratio

样品本底量

加入量

测得总量

回收率

/mg/mg/mg/%果糖41722100619510314葡萄糖1123210031229917蔗糖

5176

2100

7184

10111

214　样品分析

取一定量的样品,用流动相稀释1倍后,按上述

色谱条件进行测定,样品色谱图见图2。样品测定结果见表3。

表3　样品分析结果

Table3　Analysisresultsofsamples

含量/mg

样品编与

果糖

葡萄糖

蔗糖

14172112351762218401847110

391590188

—

4

0127

—

7152

(71090)果糖　(71842)葡萄糖　(91795)蔗糖

图2　样品色谱图

Fig.2　Chromatographicspectrumofasample

　　样品1、2、3、4酶解条件不同,不同的酶解条件

其产物不同。实验结果表明,酶解彻底的样品3其产物主要是果糖和少量的葡萄糖。这与文献[3]相吻合。所以,建立高效液相色谱法来分析检测菊粉酶解的产物,可为菊粉酶解生产过程中的质量控制提供科学依据。

3　结束语

对于糖类的测定有纸张色谱、薄层色谱、气相色谱和经典离子交换色谱等方法,以上方法因操作手续繁杂,条件不易控制,不能良好地分离出各个组分,引入的误差大。本文建立的高效液相色谱法较上述方法具有操作方法简捷,分析条件易于精确控制,待测成分易于与干扰组分分离完全的特点,因而本方法具有较好重现性和较高的准确度,为菊粉酶解过程的质量控制提供了科学方法。

本研究采用的色谱柱,流动相,检测器均为HPLC分析的最基本配置,测定条件亦为最基本的实验条件,故具有广泛的适应性和较好的实用性[4,5],从色谱图上看除了所测定的三个组分外,还有其他的色谱峰,它们也为菊粉酶解产物,但目前没有标样,故无法对其定性和定量测定。

参考文献

[1]　丹尼尔・拉佩兹.科学技术百科全书(中译本)[M].北

京:科学出版社,1982.15

[2]　中国饲用植物志编辑委员会编.中国饲用植物志[M].

北京:农业出版社,1989

[3]　HaraguchiK,HayashiK,KasumiT.Purificationand

propertiesofinulinasefromarthrobacterS6421[J].Starch/Staerke,1990,42(1):28-30

[4]　王文辉,彭永芳.低聚果糖HPLC的快速测定[J].食品

科学,1999,20(3):53-54

[5]　董海欧,倪　钟,张津枫,等.高效液相色谱2蒸发光散

第1期　　　　　　　　　　　　孙彦璞等:高效液相色谱法测定菊粉酶解产物

射检测器分析糖类化合物[J].食品科学,1999,20

(11):50-52

・111・

HPLCdeterminationofinulinzymohydrolysisproducts

SUNYan2pu1,2　YANGWen2yuan2　JIANGLing3

(11CollegeofScience,BeijingUniversityofChemicalTechnology,Beijing100029,China;21CollegeofChemicalEngineering;

3.CollegeofMunicipalEnvironment,NingxiaUniversity,Yinchuan750021,China)

Abstract:Glucose,fructoseandsaccharoseininulinzymohydrolysisproductsweredeterminedbyHPLCmethod.Thechromatographicconditionsarelistedasfollow:Shim2PackCLC2NH2column,RID26Adetector,andamobilephasecomposedofacetonitrileandwaterwiththeratioof7∶3.Thescientificfoundationforthede2terminationofinulinzymohydrolysisproductswasprovided.

Keywords:inulinzymohydrolysisproducts;HPLC;glucose;fructose;saccharose

(责任编辑　邓建元)

(上接第108页)

Preparationandgas2sensingpropertiesofnanosizedα2Fe2O3

YANTao　BAIShou2li　CHENAi2fan　LUORui2xian

(CollegeofScience,BeijingUniversityofChemicalTechnology,Beijing100029,China)

Abstract:Nanosizedα2Fe2O3powderswaspreparedbytheprecipitationmethodandathickfilmofα2Fe2O3basedsensorwasfabricated.Thephasecomposition,grainsizeandtheparticlesizedistributionofα2Fe2O3sam2plewerestudiedbyTG2DTA,TEMandzetasizedistributionanalysis.Theeffectsofthedopednoblemetalsorcarbonateandthecalcinationtemperatureonthesensitivityofsensorswerestudied.Theresultsshowthattheparticlesofα2Fe2O3areinthenanometersizerange,andα2Fe2O3calcinatedat600℃anddopedwith3%noblemetalorSrCO3presentsthebestsensitivitytoCO.Keywords:α2Fe2O3;CO;gas2sensingproperties;doping

(责任编辑　邓建元)