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探讨乙肝五项酶联免疫吸附法检测结果常见影响因素分析

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探讨乙肝五项酶联免疫吸附法检测结果常见影响因素分析

发表时间:2014-06-09T15:15:14.683Z 来源:《中外健康文摘》2014年第2期供稿 作者: 许卫萍[导读] 酶联免疫吸附法具有特异性好以及灵敏度较高等优点,现如今在临床上已经被广泛使用。

许卫萍 (福建省泉州市惠安县医院检验科 362100)

【摘要】目的 分析乙肝五项酶联免疫吸附法检测的常见影响因素。方法 将本次研究中的血清标本分成抗凝组和不抗凝组,两组标本同时进行检测,通过胶体金标法检测对其进行比较,对各组的HbsAg阳性率进行分析。结果 使用酶联免疫吸附法对血清状态的HbsAg阳性率进行检测,抗凝组的阳性率明显高于不抗凝组,不抗凝组的假阳性率较低;与胶体金标法相比,酶联免疫吸附法的灵敏度较高。结论 在对HbsAg进行检测时,使用酶联免疫吸附法检测可能会出现误差,造成影响的原因多样,但最主要是标本溶血,为了提升检测准确率,应当对血清标本进行必要处理。

【关键词】乙肝五项 酶联免疫吸附法 影响因素

【中图分类号】R446.61 【文献标识码】A 【文章编号】1672-5085(2014)02-0155-02

酶联免疫吸附法具有特异性好以及灵敏度较高等优点,现如今在临床上已经被广泛使用[1]。但是在实际操作过程中,各个环节对试验的最终结果影响都相对较大,若是未按常规操作,则很有可能出现假阴性或是假阳性的情况[2]。本研究旨在于探讨酶联免疫吸附法在检测HbsAg时可能出现的各种影响因素,找出产生误差的原因并采取有效措施,现将报道如下: 1.一般资料和方法 1.1一般资料

选取2011年4月-2013年10月期间我院检测的血标本共320例,根据血清标本的状态不同,分成抗凝组和不抗凝组各160例,其中男性150例,女性170例,年龄15-50岁,平均年龄(32.1±11.2)岁,所有患者均无相关肝炎病史。 1.2方法

酶联免疫吸附法的步骤以试剂说明书为准,即:阴性对照平均值×2.1≤样品A值时,判定为阳性,反之则判定为阴性;胶体金标准方法同样以试剂说明书为准,若是出现反应线和红色质控线为阳性,若是只出现红色质控线则被判定为阴性。 1.3统计学分析

本研究数据以SPSS18.0软件进行分析,计量资料以(x-±s)表示,比较以t检验;计数资料的比较经x2检验,以P<0.05表示差异有统计学意义。 2.结果

对不同状态血清的HbsAg使用酶联免疫吸附法进行检测,抗凝组的阳性率明显高于不抗凝组,具备统计学意义,P<0.05,见表1。 表1 通过酶联免疫吸附法检测不同状态血清的HbsAg 组别 例数 阳性例数 阴性例数 阳性率(%) 不抗凝组 160 20 140 12.5% 抗凝组 160 60 100 37.5%

2.2通过酶联免疫吸附法对HbsAg阳性敏感率为90%(36/40),与胶体金标法检测的HbsAg阳性率敏感性相比明显较高,80%(36/45),酶联免疫吸附法的特异性85.6%(240/280),与胶体金标发相比明显较低,98.5(271/275),见表2。 表2 两种方法检测HbsAg的特异性以及灵敏度比较 金标法 合计 ﹢ - 酶联免疫吸附法 ﹢ 36 9 45 - 4 271 275 合计 40 280 320 3.讨论

对于乙肝病毒感染而言,乙肝病毒表面抗原是最为重要的病原标志和证据。现如今,酶联免疫吸附法已经成为判定乙型肝炎的主要手段。在对被试者进行检查时,HbsAg若呈现阴性则说明正常,最终报告结果准确性极为重要[3]。在对血液样本进行检测时,酶联免疫吸附法的操作过程会涉及到血液的留取和处理,最后通过加样、洗板、显色等一系列步骤判定最终的测试结果,在这些步骤中,每一步都会对最终的检测结果产生直接影响,稍有误差便会出现假阳性或假阴性。

本次研究中,选用不同状态的血清作为研究对象,通过结果显示,抗凝组血液样本的阳性率明显高于不抗凝组的血液样本(P<0.05)具备统计学意义,说明不抗凝组的假阳性率较低。在对HbsAg进行检测时,出现假阳性率的根本原因是由于其中的纤维蛋白较多,导致这一情况的根本原因可能是分离不彻底或标本溶血,使最终的测试结果产生了误差。酶联免疫吸附法与胶体金标法相比,虽然特异性较低,但灵敏度却很高。

为了能够尽量避免酶联免疫吸附法产生误差,得到尽可能准确的检测结果,在测试时应当注意:1、为便于标本离心彻底,可给予血清标本抗凝血;2、确保血块浓缩,避免异物导致出现假阳性结果;3、在对血清进行离心分离时加大转速,充分离心标本,对离心时间进行延长,防止纤维蛋白或红细胞对血清样本的影响;在最后对血液样本进行加样操作时要注意手法,防止应手法不当而吸收到纤维蛋白或红细胞[4]。

简而言之,对于治疗乙型肝炎而言,乙肝五项是非常重要的指标,检验者应当在每个环节中秉承严谨认真的态度,认真做好每一个检测环节,使最终的结果真实准确,更好的为临床服务。 参考文献

[1]臧勇.酶联免疫吸附法检测乙肝五项结果常见影响因素分析[J].中国实用医药,2010,24:124-125.

[2]蒋福国,薛海斌.乙肝五项酶联免疫吸附法检测结果常见影响因素分析[J]. 中国煤炭工业医学杂志,2013,09:1057.228-229

[3]王一丁.酶联免疫吸附法检测HbsAg结果的影响因素探讨[J].海南医学,2012,24:103-105.

[4]陈冰.应用酶联免疫吸附法检测乙肝表面抗原的影响因素探讨[J]. 北方药学,2013,04:61.1-192

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