实验项目指导书—天然水中油类的紫外分光光度法测定

一、实验目的

加深对环境中油类污染的认识，掌握油类的分析方法和技术，学会使用紫外分光光度计。

二、实验原理

水中的油类来自较高级生物或浮游生物的分解，也有来自工业废水和生活污水的污染。漂浮于水体表面的油，影响空气—水体界面中氧的交换。分散于水中的油，部分吸附于悬浮微粒上，或以乳化状态存在于水体中，部分溶于水中。水中油可被微生物氧化分解，从而消耗水中溶解氧，使水质恶化。

重量法是常用的分析方法，它不受油的品种，所测定的油不能区分物矿物油和动、植物油。重量法方法准确，但操作繁杂，灵敏度差，只适于测定5mg/L以上的油品。紫外分光光度法比重量法简单。石油类含有的具有共轭体系的物质在紫外光区有特征吸收峰。带有苯环的芳香族化合物主要吸收波长为256-260nm，带有共轭双键的化合物主要吸收波长为215-230nm。一般原油的两个吸收峰波长为225及256nm，其他油品如燃料油、润滑油等的吸收峰也与原油相近。本方法测定波长为256nm，最低检出浓度为0.05mg/L，测定上限为10mg/L。

三、仪器和试剂

1 紫外分光光度计（具有1cm石英比色；皿）。 2 1L分液漏斗。

3 25mL容量瓶。

4 石油醚（60—90℃）或正已烷；纯化后使用，透光率应大于80%。如不纯，可用下法纯化。

纯化：将0.03-0.05mm（60—100目）粗孔微球硅胶和0.246-0.125mm（70-120目）中性层析氧化铝在150-160℃活化4h，趁温热装入直径2.5cm、长75cm的玻璃柱中，使硅胶柱高60cm，上面覆盖5 cm厚的氧化铝层。将石油醚通过此柱后收集于试剂瓶中。以水为参比，在256nm处透光率应大于80%。

5 油标准贮备液：用20号重柴油、15号机油或其他认定的标准油品配制。准确称取标准油品0.1000g溶于石油醚中，移至100mL容量瓶中，并用石油醚稀释至标线，此溶液每毫升含1.0mg油，贮于冰箱备用。 6（1+1）硫酸

7氯化钠

8 无水硫酸钠（事先于马福炉中300℃烘1h，冷后装瓶）

四、实验步骤

1标准曲线绘制 把油标准贮备液用石油醚稀释为每毫升含0.100mg油的标准液。向8个10mL容量瓶中依次加入油标准液0.20，0.50，1.00，2.00，3.00，5.00，7.00，10.00mL，用石油醚稀释到标线。其相应的浓度为2.00,5.00,10.00,20.0,30.0,50.0,70.0,100.0mg/L.最后，在波长256nm处，用1cm石英比色皿，以石油醚为参比液测定标准系列的吸光度，并绘制标准曲线。

2 将水样500mL全部倾入1000mL分液漏斗中，加入5mL（1+1）硫酸（若水样取样时已酸化，可不加）及 20g氯化钠，加塞摇匀，用15mL石油醚洗采样瓶，并把此洗液移入分液漏头号中，充分振摇2min（注意放气）静置分层。把下层水样放入原采样瓶中，上层石油醚放入25mL容量瓶中，再加入10mL石油醚，重复提取水样一次，合并提取液于容量瓶中。加入石油醚至标线，摇匀。若容量瓶里有水珠或浑浊，可加入少量无水硫酸钠脱水。 3 在波长256nm处，用1cm石英比色皿，以脱芳烃的石油醚为参比，测定其吸光度，并在

标准曲线上查出相应的浓度值。

五、结论与讨论

1 C油(mg/L)= C×V2/V1

式中：C—从标准曲线上查出的相应油浓度（mg/L）；

V1—被测水样体积（ml）；

V2—石油醚定容体积（mL）。

2 使用的石油醚应在一个较大的容器中混匀，使用相同透光率的石油醚，绘制标准曲线及样品测定，否则会由于空白值不同而产生误差。

3采集的样品必须有代表性，当只测定水中乳化状态的油时，要避开漂浮在水表面的油。一般在水表面以下20-50cm处取水样，若要边同油一起采样，要注意水的深度，油膜厚度及覆盖面积。

4 采样瓶应为定容的（如500或1000mL)清洁玻璃瓶，用溶剂清洗干净，勿用肥皂洗耳恭听，每次采样时，应装水至刻线。

5 为了保存水样，采集样品之前，可向瓶里加入硫酸[每升水样加5mL（1+1）硫酸]，使水样PH小于2，以抑制微生物活动，于低温下（<4℃）保存。在常温下，样品可保存24h。